免疫組化試劑盒的基本原理是抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水 性部分相互吸附，并保持其免疫學(xué)活性； 抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué) 和酶學(xué)活性； 酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反 應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。
免疫組化試劑盒避免顯色淡及靈敏度偏低的方法：
A、盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間，夏季應(yīng)放冰塊降溫。
B、免疫組化試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開(kāi)盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫。
C、注意培養(yǎng)箱溫度，放入反應(yīng)板后盡量減少開(kāi)啟次數(shù)以免影響溫度恒定，非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意。
D、校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)。
E、按說(shuō)免疫組化試劑盒明書要求保留洗滌時(shí)間，準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)。
F、校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時(shí)要緊密，吸嘴內(nèi)壁要清潔，一次性使用。
G、使用新鮮合格的蒸餾水。
免疫組化試劑盒的使用要點(diǎn)：
1. 修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來(lái)水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。
2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過(guò)的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。
3. 若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。
4. 封片前一定要換用TBS 充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween 20，否則會(huì)影響結(jié)果觀察。
5. 如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。
免疫組化試劑盒以HRP 標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物為基礎(chǔ)，可用于檢測(cè)小鼠細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。
在線咨詢
電話咨詢
